利用斑马鱼模型评价保护大脑功效

【评价原理】

    斑马鱼是一种与人类同源性较高的脊椎动物,大脑具有典型脊椎动物脑部形态学特征,髓鞘结构特征和少突胶质细胞分化过程与哺乳动物高度一致。而且斑马鱼生长发育周期短,神经系统简单,有利于开展脑保护剂的研究。中枢神经损伤常表现为偏瘫、失语、智力障碍或昏迷,甚至死亡。霉酚酸吗啉乙酯可以抑制斑马鱼神经元轴突的生长,干扰神经及细胞的迁移和导致发育畸形,使神经元细胞凋亡,可用于制造中枢神经损伤的斑马鱼模型。

    经过特异性荧光染色(凋亡细胞呈绿色),中枢神经损伤的斑马鱼在脑和脊髓部位会布满凋亡细胞,比正常斑马鱼明显增多,可以明显被观察到。

【实验方案】

    我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用脑保护剂组。其中正常对照组未经任何处理,模型对照组与服用脑保护剂组都摄入了等量的霉酚酸吗啉乙酯(霉酚酸吗啉乙酯通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用脑保护剂组在摄入霉酚酸吗啉乙酯的同时摄入还原型谷胱甘肽、养血清脑颗粒和安宫牛黄丸之类的脑保护剂。

    服用一段时间脑保护剂后,我们对斑马鱼整体进行特异性荧光染色,观察中枢神经细胞的凋亡情况。

【结果展示】

图1. 斑马鱼中枢神经保护表型图。(黄色虚线区域为中枢神经,绿色光点为凋亡细胞)

    可以看到,服用脑保护剂组的中枢神经情况与正常对照组比较相似,没有明显的细胞凋亡。

【评价结论】

    1、 经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用脑保护剂组的中枢神经情况与正常对照组相似,并未出现模型对照组大量凋亡细胞的情况;

    2、本实验证实了还原型谷胱甘肽、养血清脑颗粒和安宫牛黄丸具有明显保护大脑(中枢神经)功效。