利用斑马鱼模型评价酒精性肝损伤保护作用

【评价原理】

    斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,斑马鱼肝脏中有许多与哺乳动物同源的脂质代谢酶,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。而且斑马鱼幼鱼通体透明,容易观察到毒性表型。酒精性肝损伤是全世界发病率和死亡率的主要原因,酒精性肝损伤是过量饮酒的结果。当患者继续饮酒时,会诱发严重的肝损伤形式,如脂肪性肝炎,纤维化,肝硬化和肝细胞癌。用乙醇可以诱发斑马鱼肝脏损伤,模拟人的肝脏疾病。

    我们评价斑马鱼肝脏毒性有4个指标:1.肝脏面积;2.肝脏变性程度;3. 卵黄囊吸收延迟的发生率(卵黄囊是脂肪,卵黄囊吸收与肝功能密切相关);4. 肝脏病理切片。

【实验方案】

    我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用肝保护剂组。其中正常对照组未摄入乙醇,模型对照组与服用肝保护剂组都摄入了等量的乙醇(乙醇通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。肝保护剂组在摄入对乙醇的同时摄入美他多辛之类的肝保护剂。

    服用一段时间肝保护剂后,我们在显微镜下观察斑马鱼肝脏及卵黄囊表型,同时制作成病理切片观察肝脏的病理结构变化。

【结果展示】

图1. 斑马鱼肝脏表型图

    从病理切片中也能看出来,正常对照组肝细胞核规则清晰,肝细胞结构正常,边缘清晰。乙醇处理后,斑马鱼肝细胞结构模糊、肝细胞核肿大,肝组织出现脂肪空泡样变性,而肝保护剂组细胞和正常斑马鱼中形态相似。

【评价结论】

    1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,肝保护剂组斑马鱼肝脏与正常对照组相似,并未出现模型对照组的肝脏肿大、肝变性和卵黄囊吸收延迟情况。

    2.本实验证实美他多辛对斑马鱼肝脏的保护作用。