利用斑马鱼模型评价对caspase的诱导作用

【评价原理】

    Caspase家族在细胞凋亡的调控上起着重要的作用。Caspase分为三大类:凋亡启动因子、凋亡执行因子和炎症介导因子。凋亡启动因子在级联反应的上游,包括(Caspase-8和Caspase-9)等,能识别和激活下游的Caspase。Caspase-9参与线粒体途径介导的细胞凋亡。凋亡执行因子在级联反应的下游,包括Caspase-3和Caspase-7等,作用于其特异性底物并导致细胞凋亡。Caspase-3是Caspase家族中的,最重要的凋亡执行者之一,大多数引发细胞凋亡的因素,最终均需要通过caspase-3介导的信号传递途径,它的活化是凋亡进入不可逆阶段的标志。

    我们评价斑马鱼对caspase的诱导作用有3个指标:1.对caspase 3的诱导作用;2.对caspase 8的诱导作用;3.对caspase 9的诱导作用。

【实验方案】

    我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和供服用/注射试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中或注射的方式摄入到斑马鱼体内)。

    服用/注射供试品一段时间后,利用特异性试剂盒检测斑马鱼体内caspase的活性。

【结果展示】

图1. 斑马鱼caspase3活性。(与正常对照组比较,*** p < 0.001)

图2. 斑马鱼caspase8活性。(与正常对照组比较,*** p < 0.001)

图3. 斑马鱼caspase9活性。(与正常对照组比较,*** p < 0.001)

    可以看到,服用/注射供试品组与正常对照组比较caspase活性明显上升。

【评价结论】

    1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射供试品组的斑马鱼caspase活性明显上升,与正常对照组存在明显的差别。

    2.本实验证实了该供试品对斑马鱼caspase有诱导作用。