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【评价原理】
斑马鱼肝脏从受精后22小时(22 hpf)开始发育,24-50 hpf分化,2天(2 dpf)形成初级形态,3天(3 dpf)完全成熟,其肝脏结构与哺乳动物不同,肝细胞呈小管状排列,而非板状。尽管解剖结构有差异,但细胞类型和功能相似,且具有同源的药物代谢酶基因(如cyp1a、cyp2r1、cyp2u1)。肝纤维化是肝脏对有害刺激的持续愈合反应,涉及HSCs激活和ECM沉积。TAA具有肝毒性,代谢后干扰RNA转移,激活磷脂酶A2,导致肝细胞凋亡和肝损伤。TAA诱导的肝纤维化表现为胶原沉积、纤维化标志物(Hand-2、Acta-2)和炎症因子(TGF-β、SDF-1a、SDF-1b)表达增加,肝脏缩小,与人类肝纤维化机制高度相似。
【实验方案】
我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组不进行其他处理,模型对照组和供试品组均用TAA诱导。供试品组在TAA处理后,立即摄入供试品。
服用一段时间供试品后,对斑马鱼整体进行包埋切片和氨银染色,经生物显微镜观察斑马鱼肝纤维化情况。
【结果展示】
图1. 斑马鱼肝脏脂肪染色强度表型图
(网状纤维着黑色,胶原纤维着黄或黄褐色,细胞核着褐或黑褐色,红色箭头指向网状纤维)
从实验结果可以看到,服用供试品组斑马鱼肝纤维化较模型对照组显著改善。
【评价结论】
1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用或注射供试品组的斑马鱼肝纤维化较模型对照组显著改善。
2.本实验证实供试品具有改善肝纤维化功效。
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