利用斑马鱼模型评价抗蓝光眼损伤功效

【评价原理】

长期暴露于手机、LED等蓝光会诱导视网膜氧化应激、线粒体损伤与细胞凋亡，已被证实是青少年近视加深、干眼及老年黄斑变性（AMD）加速的关键危险因素。

斑马鱼眼部结构发育与人体相同，均由三种不同的胚胎组织（神经外胚层、表面外胚层、神经嵴细胞）发育而来的。斑马鱼在72 hpf有视觉反应，此时视网膜类似于成人视网膜形态，在解剖学（不同视网膜层的结构特征、细胞排列的相似性）和功能上与人类相似。斑马鱼的视网膜结构具有在空间上排列成高度组织化的异型光感受器镶嵌的光感受器亚型，并且由于斑马鱼的昼夜性质，它类似于人类黄斑富含视锥细胞，从而导致具有接近人类的视锥细胞密度的色觉。视网膜色素上皮层细胞对蓝光最为敏感，过量的蓝光可以引发氧化应激反应，氧化产物诱发细胞凋亡和自噬的发生，进而对眼造成永久性损伤。用蓝光光源照射斑马鱼，斑马鱼产生氧化应激，视网膜组织层厚度减少，视网膜细胞发生凋亡，导致眼损伤。用特异性荧光染色（呈绿色），眼损伤斑马鱼眼细胞凋亡较正常斑马鱼明显增多，在荧光显微镜下可以观察到

我们评价抗蓝光眼损伤功效有多个指标：1.眼部凋亡细胞荧光强度；2.ROS水平（荧光值）；3.氧化损伤相关酶活性检测：SOD、MDA、CAT等；4.斑马鱼眼部病理切片；5.QPCR检测相关基因表达量（凋亡相关基因bax、bcl-2、caspase3等；炎症相关因子il-1β、il8、tnfα等）。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组不照射蓝光，模型对照组与服用供试品组都照射相同强度的蓝光。服用供试品组在照射蓝光后摄入供试品。

服用一段时间供试品后，我们对斑马鱼整体做凋亡细胞特异性染色，观察眼部细胞凋亡情况。

【结果展示】

图1. 斑马鱼眼部凋亡细胞荧光强度表型图

(红色箭头所指的绿色荧光颗粒为凋亡细胞)

从实验结果可以看到，供试品组凋亡细胞数量较模型对照组明显减少。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用或注射供试品后，凋亡细胞数量较模型对照组明显减少。

2.本实验证实供试品具有抗蓝光眼损伤功效。

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