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一、实验动物
品系:C57BL/6小鼠
性别:雄性
年龄:
自然老化模型:10月龄
氧化损伤模型:8-10周龄
二选一
二、实验分组
1)正常对照组:空白对照
2)模型对照组:氧化损伤造模 只有用氧化损伤模型的才需要这个组
受试样品:
3)低剂量组:氧化损伤造模+低剂量的受试样品(参考值:人体服用量5倍)
4)中剂量组:氧化损伤造模+中剂量的受试样品(参考值:人体服用量10倍)
5)高剂量组:氧化损伤造模+高剂量的受试样品(参考值:人体服用量20倍)
每组数量一般为10-12只,最少8只
氧化损伤模型需要造模+给药后检测,自然老化模型不用造模即可直接给药后检测
三、实验方法
1)适应性饲养后,除空白组外各组小鼠腹腔注射0.1ml/Kg的D-半乳糖,每日一次,连续6周。
2)6周后,各组抽血检测血清内MDA水平,以MDA水平进行随机入组(自然老化模型无需上述步骤,直接检测血清内MDA水平即可分组)
3)按上述分组给予受试样品灌胃,每日1次,共28天。
四、检测指标
实验完成后处死各组小鼠,ELISA试剂盒检测以下指标:(血清or组织匀浆)
1)脂质氧化产物:MDA或8-Isoprostane
2)蛋白质氧化产物:蛋白质羰基
3)抗氧化酶活力:SOD或GSH-Px
4)抗氧化物质:GSH
五、判断标准
脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质四项指标中三项阳性,可判定该受试样品有助于抗氧化动物实验结果阳性。
方案
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