利用斑马鱼评价供试品急性胚胎毒性

【评价原理】

急性毒性试验是了解外源化学物对机体产生急性毒性的根本依据，也是毒理学安全性评价的第一步工作，斑马鱼早期发育阶段的胚胎期是其对外界环境最为敏感的阶段。斑马鱼的急性胚胎毒性对于化妆品的安全性评价具有重要的实际意义。毒性机制包括改变胚胎全基因表达、microRNA 表达及心脏AhR和Wnt/β-catenin 通路相关基因表达等，导致胚胎毒性。斑马鱼胚胎发育快、通体透明，被广泛应用于供试品的急性毒性评价。 

将斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的受试物溶液，一定时间段后记录斑马鱼胚胎的死亡率，确定50%试验鱼胚胎死亡的受试物浓度，用LC50表示。

【实验方案】

配制一定浓度系列的受试物溶液，在斑马鱼发育初期（4hpf-6hpf）分别水溶加入受试物，同时设置正常对照组，孵育一定时间后分别观察每组斑马鱼的发育状况，以卵凝结、体节异常、尾部未分离等判定胚胎死亡。记录每组斑马鱼胚胎的死亡率，绘制“浓度-死亡率”效应曲线，计算LC50值。

【评价指标】

1、LC50

【结果展示】（展示图片仅供参考，实际实验组别依据合同而定）

1、斑马鱼胚胎死亡判定（包含但不限于以下几张类型）

图1. 斑马鱼胚胎死亡判定表型图

2、LC50值：“浓度-死亡率”效应曲线

图2. 斑马鱼胚胎“浓度-死亡率”效应曲线

【评价结论】

斑马鱼胚胎随着受试物浓度的增加逐渐出现死亡特征，LC50值为31.5μg/ml。

【参考文献】

[1] OECD GUIDELINES FOR THE TESTING OF CHEMICALS：Fish Embryo Acute Toxicity (FET) Test