斑马鱼转基因品系制备

服务简介

1.转基因

转基因技术是指利用分子生物学手段，将外源基因（来自其他物种或人工合成的DNA片段）导入目标生物体的基因组中，使其获得新的遗传性状的技术。

Tol2属于hAT家族的DNA转座子，最初从青鳉鱼的基因组中分离鉴定。作为自主性转座子，Tol2自身编码具有催化活性的转座酶，能够识别转座子两端的反向末端重复序列（ITRs），介导"剪切-粘贴"式的DNA转座。

实际应用中，通常为体外合成的Tol2转座酶mRNA和ITR之间装载外源片段的质粒联用。

2. Tol2转座子介导的转基因技术优点

2.1 Tol2系统的生殖系整合效率可达30%–70%，极大降低了筛选和饲养难度；

2.2 Tol2 转座子可稳定携带 10 kb 以上的外源 DNA 片段，研究者能够插入完整的基因座（包括内含子、调控元件）或多基因表达框，实现复杂的遗传操作；

2.3 单拷贝、多拷贝整合的灵活，整合位点相对随机，但无明显的区域偏好性，覆盖整个基因组；

2.4 Tol2转座酶在斑马鱼、小鼠、人细胞系、爪蟾、鸡等多种生物中均具有活性，载体系统具有高度的跨物种通用性。在斑马鱼中建立的载体和策略可快速迁移至其他模式生物。

服务流程

▲客户提出转基因品系制备需求→▲分析可行性→▲构建载体→▲斑马鱼胚胎注射→▲founder筛选→▲F1代斑马鱼养殖

环特生物优势

1.特有的养殖方法可缩短服务周期；

2.丰富的经验和及时沟通助力科研实验。

案例展示

可用于雌激素检测评价的5×ERE: EGFP品系。

参考文献

Kawakami K, Shima A, et al. Proc Natl Acad Sci. 2000 Oct 10;97(21)11403-8.pdf

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