利用斑马鱼模型评价防治多发性硬化症功效

【评价原理】

多发性硬化症（Multiple sclerosis，MS）是一种由免疫介导的中枢神经系统慢性炎症性疾病，以少突胶质细胞丢失和轴突脱髓鞘为特征。少突胶质细胞是中枢神经系统的髓鞘细胞，起源于少突胶质前体细胞。

斑马鱼的髓鞘少突胶质细胞和髓鞘形成机制与人类保守，斑马鱼髓鞘少突胶质细胞的结构特性和细胞谱系关系与哺乳动物具有高度可比性。主要的髓鞘蛋白编码基因（如髓鞘碱性蛋白（Mbp）、髓鞘蛋白脂蛋白（Plp）和髓鞘蛋白零（P0蛋白））在斑马鱼和人类中同源，并且基因功能相似。

溴化乙锭是一种能插入双链DNA碱基对之间的平面分子，可抑制DNA的转录和复制，且对病变区域的所有细胞都具有毒性，研究表明溴化乙锭导致少突胶质细胞和星形胶质细胞死亡，髓鞘形成障碍，最终导致脱髓鞘。溴化乙锭诱导斑马鱼脊髓神经细胞髓鞘损伤，诱导中枢神经脱髓鞘，与人类脱髓鞘患者中观察到的病理生理学相似。Mbp是斑马鱼髓鞘的主要组成部分，是维持神经元及轴突髓鞘结构和功能稳定的重要物质基础，是髓鞘脱失变化特异敏感的指标。用整体斑马鱼免疫荧光染色方法对Mbp进行定量分析，通过检测斑马鱼髓鞘染色荧光强度评价样品防治多发性硬化症功效。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组未摄入溴化乙锭，供试品组在摄入样品一段时间后和模型对照组给入等量的溴化乙锭。

处理一段时间供试品后，通过检测斑马鱼髓鞘染色荧光强度评价样品防治多发性硬化症功效。

【结果展示】

图1. 斑马鱼髓鞘细胞典型图

(白色箭头指示斑马鱼髓鞘细胞)

从实验结果可以看到，提前服用供试品组斑马鱼髓鞘细胞荧光强度明显高于模型对照组。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，提前服用供试品组斑马鱼髓鞘细胞荧光强度明显高于模型对照组。

2.本实验证实L-甲状腺素钠具有防治多发性硬化症功效。

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