利用斑马鱼模型评价认知功能障碍改善功效(双酚AF)

【评价原理】

认知功能障碍是一种影响认知能力的心理健康障碍,主要有执行功能、学习和记忆、感知运动功能、语言、复杂注意力和社会认知等6种认知能力缺陷,通常会引起学习记忆障碍,并伴有失语、失用、失认、失行等表现。斑马鱼在神经解剖组织和神经递质信号通路中表现出高度保守性。斑马鱼的背侧、内侧和外侧钝分别对应哺乳动物的等皮层、杏仁核和海马体。斑马鱼与学习和记忆相关的神经行为早已报道,与人类相当的行为表现如运动活动、焦虑样行为、学习、记忆保留、空间和物体识别、恐惧反应、社会偏好和互动等,都能在斑马鱼身上得到体现。

双酚化合物是合成高分子材料的重要原材料之一,主要包括双酚A、双酚B、双酚F和双酚AF,其结构都较为相近,且都具有神经发育毒性,对斑马鱼的运动行为具有抑制作用,同时会损伤神经胶质细胞,影响突触的形成和神经递质的释放,最终导致学习记忆能力下降。颜色偏好试验可作为记忆评估、认知功能障碍、神经退行性疾病评估、毒性行为评估等有效方案。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组未摄入双酚AF,模型对照组与服用供试品组摄入了等量的双酚AF。服用供试品组同时摄入样品。

服用一段时间供试品后,我们可检测(1)十字迷宫蓝色区域占比;(2)乙酰胆碱酯酶活性;(3)QPCR检测相关基因表达量:脑源性神经营养因子bdnf、胶质细胞源性神经营养因子gdnf等;(4)多巴胺神经元面积。


【结果展示】

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图1. 斑马鱼蓝色区域占比典型图

注:蓝色方框内为十字迷的蓝色区域,为定量的区域

从实验结果可以看到,服用供试品组斑马鱼十字迷宫蓝色区域占比较模型对照组有所提升。


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图2. 斑马鱼整体乙酰胆碱酯酶活力柱状结果图

从实验结果可以看到,服用供试品组斑马鱼整体乙酰胆碱酯酶活力较模型对照组有所下调。


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图3. 斑马鱼多巴胺神经元典型图

(红色箭头所指为斑马鱼脑内多巴胺神经元)

从实验结果可以看到,服用供试品组斑马鱼多巴胺神经元面积较模型对照组明显增多。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用供试品组的斑马鱼认知能力、乙酰胆碱酯酶活力、多巴胺神经元比例较模型对照组明显改善。

2.本实验证实依达拉奉具有认知功能障碍修复功效。


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