利用斑马鱼模型评价改善气虚血瘀功效

【评价原理】

气虚血瘀证是中医心血管病辨证的重要证型，其基本内涵是气虚无力推动血液循行，进而出现血行不畅甚至瘀滞，最终导致气虚血瘀证。有学者将中医的“气” 归结为人所呼吸的空气和能量代谢的基础物质，与ATP的生成有着极大的关联，ATP可以将单个的细胞骨架组装成为肌动蛋白，进而维持心肌收缩和舒张功能，发挥行血作用。人体气不足则无法入肺以呼吸，肺气无法贯入心脉，则体气虚则血不行。人体在缺氧条件下，葡萄糖通过无氧糖酵解产生丙酮酸和少量的ATP，最后丙酮酸被还原成乳酸，从而使乳酸堆积，心脏需要的能量代谢需求巨大，需要源源不断地生产ATP，缺氧条件下少量的ATP生成不能使心脏所需能量得到很好的补充，从而影响心肌的正常收缩功能，导致血流受到影响，血流速度减慢和心输出量降低，最终机体其他正常功能下降。无水亚硫酸钠通过化学反应消耗水中氧气，营造缺氧的环境。异丙肾上腺素盐酸盐诱导可导致斑马鱼出现血流速度减慢和心输出量降低。异丙肾上腺素盐酸盐属于β受体激动剂，可使心脏收缩力增强、心率加快、传导加速、心排血量增加、心肌耗氧量增加，既往研究表明异丙肾上腺素盐酸盐可诱导动物心肌损伤。以上提示采用异丙肾上腺素盐酸盐诱导的斑马鱼可出现明显的心肌损伤以及血瘀表现和体征。

我们评价改善气虚血瘀功效有4个指标：1.总运动距离；2.整体乳酸含量；3.整体ATP含量；4.血流速度和心输出量。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组不进行其他处理，模型对照组和供试品组均用无水亚硫酸钠和异丙肾上腺素盐酸盐共同诱导。供试品组在无水亚硫酸钠和异丙肾上腺素盐酸盐处理后，立即摄入供试品。

服用一段时间供试品后，经行为分析仪检测斑马鱼总运动距离，置于酶标仪下检测ATP含量，置于血流分析仪中检测血流速度和心输出量。

【结果展示】

图1. 斑马鱼轨迹典型图

（黑、绿、红线分别为慢、中、快速运动距离）

图2 .整体ATP含量柱形图

图3 血流速度柱形图

图4 心输出量柱形图

从实验结果可以看到，服用供试品后，总运动距离、ATP含量、血流速度和心输出量比模型对照组明显升高。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，相对于模型对照组，服用或者注射供试品组之后，总运动距离、ATP含量、血流速度和心输出量升高。

2.本实验证实供试品组具有改善气虚血瘀功效。

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