利用斑马鱼模型评价改善男性性功能功效

【评价原理】

少精症是男性不育症的常见原因之一，临床少精症患者主要症状以精子稀少为主，精子常伴有活动力差。少精症与性腺轴功能异常有关，当性腺轴功能低下，会导致促性腺激素释放激素、促卵泡刺激素、黄体生成素等分泌异常，进而引起精液质量改变。

环磷酰胺是临床常用的免疫抑制剂和抗肿瘤药，是目前已明确可以损害生精功能的化疗药之一。环磷酰胺经肝酶激活生成磷酰氮芥，可与分化中的精原细胞DNA交联，阻断DNA合成并促发ROS-线粒体凋亡通路，致各级生精细胞大量丢失，导致长期无精或少精，被广泛用作诱导生精功能障碍的标准模型药物。斑马鱼追尾是一种求偶现象，在追逐的过程中，雌鱼会产出鱼卵，雄鱼也会排出精子，当斑马鱼性功能受损时，追尾次数会减少。

我们评价改善男性性功能功效有多个指标：1. 精子数量；2.体重、精巢重量；3.追尾情况；4.睾酮含量、卵泡生成素活力、黄体生成素活力。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组未摄入环磷酰胺，模型对照组与服用供试品组都摄入了等量的环磷酰胺（环磷酰胺通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用供试品组在摄入环磷酰胺之前摄入供试品。

服用一段时间供试品后，我们收集斑马鱼样本，采集精巢组织，利用精子活力荧光染色试剂盒进行精子染色（呈蓝色），在荧光显微镜下观察精子数量的变化。

【结果展示】

图1. 斑马鱼精子数量表型图

(蓝色颗粒为精子)

从实验结果可以看到。模型对照组的精子数量较正常对照组明显减少，供试品组相对模型对照组精子数量明显增多。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用或注射供试品组的斑马鱼精子数量较模型对照组显著增多。

2.本实验证实供试品具有改善男性性功能功效。

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