利用斑马鱼模型评价防眩晕功效

【评价原理】

头晕或眩晕是一种常见的临床症状，主要表现为自身或周围环境的旋转感或漂浮感，常由前庭系统功能障碍引起。

感知头部运动和维持平衡至关重要的前庭系统在鱼类和哺乳动物中高度保守，且其功能障碍是眩晕、跌倒的重要原因，但由于哺乳动物内耳结构脆弱复杂、毛细胞位于颞骨内且损伤不可再生、感觉输入维度高以及与多种功能整合复杂，导致其神经回路研究困难且不足。

斑马鱼凭借其幼体透明、发育快速（内耳和功能早期形成）、遗传易操作（可产生特定突变体）以及解剖和行为简单（易于观察游泳和平衡）等独特优势，有效规避了这些挑战。斑马鱼内耳由三个半规管（前、后和水平半规管）、耳石器官（椭圆囊、球囊和听壶）组成；半规管、椭圆囊主要行前庭平衡功能，而球囊及听壶则行听觉感知功能。近年来已成为研究前庭回路（特别是内耳及一阶、二阶神经元水平）的理想模式生物。用氨基糖苷类抗生素处理斑马鱼，可导致斑马鱼耳囊和侧线毛细胞损伤，斑马鱼的耳囊结构发育出现异常，包括椭圆囊和球囊形状变化，5dpf斑马鱼幼鱼在静止状态下背轴出现弯曲，行为出现异常。

我们评价防眩晕功效有多个指标：1.椭圆囊面积；2.毛细胞荧光强度；3.斑马鱼静止状态下背轴观察（定性）；4.斑马鱼游泳姿势观察（定性）；5.总运动距离（行为学）。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组未摄入氨基糖苷类抗生素，模型对照组与服用供试品组都摄入了等量的氨基糖苷类抗生素（氨基糖苷类抗生素通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用供试品组在摄入氨基糖苷类抗生素的同时摄入供试品。

服用一段时间供试品后，我们在显微镜下观察椭圆囊的变化。

【结果展示】

图1. 斑马鱼椭圆囊面积表型图

(S，saccule（球囊）；U，utricle（椭圆囊）)

从实验结果可以看到。模型对照组的椭圆囊面积较正常对照组明显减小，供试品组相对模型对照组椭圆囊面积明显增大。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用或注射供试品组的斑马鱼椭圆囊面积较模型对照组显著增大。

2.本实验证实供试品具有防眩晕功效。

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