利用斑马鱼模型评价改善感染性肠炎功效

【评价原理】

由细菌（如沙门氏菌、志贺氏菌）、病毒（如诺如病毒）、寄生虫（如阿米巴）等引起的肠道感染，可以导致急性炎症反应，引起腹痛、发热、腹泻等症状。腹痛是肠道炎症最常见的症状之一，炎症导致肠道蠕动加快，水分吸收减少，引起腹泻。

LPS（脂多糖，Lipopolysaccharide）是革兰氏阴性细菌外膜的一种成分，能够引发强烈的免疫反应，导致炎症。斑马鱼的肠道在发育、组织和功能上与哺乳动物肠道高度同源，肠上皮细胞中的基因表达和转录调控与哺乳动物高度保守，代谢功能也保守。斑马鱼在受精后5天消化系统基本发挥功能，是研究肠道炎症和损伤基本过程的重要模式生物。我们将LPS注射到斑马鱼肠腔，诱导炎症介质的产生，斑马鱼的中性粒细胞发生免疫应答，聚集在肠腔内。采用转基因中性粒细胞荧光鱼（呈绿色），可在荧光显微镜在观察到斑马鱼肠腔内的中性粒细胞比正常斑马鱼明显增多。

我们评价改善感染性肠炎功效有2个指标：1.肠道中性粒细胞数量（腹痛）；2.肠道荧光强度（腹泻）。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组未注射LPS，模型对照组和供试品组均注射LPS（LPS通过注射到肠腔的方式摄入到斑马鱼体内）。供试品组在注射LPS之后摄入供试品。

服用一段时间供试品后，我们在荧光显微镜下观察斑马鱼肠腔内中性粒细胞的数量。

【结果展示】

图1. 斑马鱼肠道中性粒细胞数量表型图

(红色箭头为斑马鱼肠腔内中性粒细胞)

从实验结果可以看到，服用供试品组肠腔内中性粒细胞比模型对照组明显减少，未出现中性粒细胞大量募集情况。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，相对于模型对照组，服用或者注射供试品组之后，肠腔内中性粒细胞数量显著减少。

2.本实验证实供试品组具有改善感染性肠炎功效。

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