利用斑马鱼模型评价改善脂肪性肝炎功效

【评价原理】

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是作为非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的一种炎症亚型,它包括肝脂肪变性以及肝细胞损伤(气球样变)和炎症。NASH与肥胖、血脂异常、2型糖尿病和代谢综合征密切相关,并且患者的肝纤维化、肝硬化、肝癌发生率明显增高,因此早期诊断并进行干预至关重要。斑马鱼通过脂蛋白运输脂肪和胆固醇,并在内脏、皮下和肌肉脂肪细胞库中作为三酰甘油(triglyceride,TG)储存,脂质代谢网络与哺乳动物相似,相关蛋白如载脂蛋白、脂肪酸转运蛋白、胆固醇转运蛋白、长链酰基辅酶的表达和功能相似,表明斑马鱼是一种适合人类脂质代谢的模型。蛋黄粉中60%为脂类,与葡萄糖共同喂养斑马鱼,通过给成年斑马鱼喂食高脂饮食,模拟人类非酒精性脂肪肝的病理学,引起脂质代谢紊乱、氧化应激、炎症反应和细胞凋亡,导致肝脏中甘油三酯和胆固醇的积累,以及肝细胞损伤和死亡,从而为研究非酒精性脂肪肝病的发病机制和治疗提供了有效的实验平台。运用转基因中性粒绿色荧光斑马鱼,在荧光显微镜下可观察到脂肪性肝炎的斑马鱼较正常斑马鱼肝脏中性粒细胞数量明显增多。

我们评价改善脂肪性肝炎功效有多个指标:1.肝脏中性粒细胞数量;2.肝脏脂肪染色强度3.肝脏病理切片;4.Fe2+荧光强度;5.ROS荧光值;6.GSH含量;7.组织中ALT活力;8.组织中AST活力。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组不进行其他处理,模型对照组和供试品组均用高糖高脂饲料诱导。供试品组在高糖高脂饲料处理后,立即摄入供试品。

服用一段时间供试品后,经荧光显微镜检测斑马鱼肝脏中性粒细胞数量。

【结果展示】

图片 1.png

图1. 斑马鱼肝脏中性粒细胞数量表型图

(黄色区域为肝脏)

从实验结果可以看到,服用供试品组斑马鱼肝脏中性粒细胞数量较模型对照组显著减少。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用或注射供试品组的斑马鱼肝脏中性粒细胞数量较模型对照组显著减少。

2.本实验证实供试品具有改善脂肪性肝炎功效。


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